Apakah Maksud Pengesanan Asid Nukleik PCR, Kaedah Dan Langkah

Apakah maksud pengesanan asid nukleik PCR, kaedah dan langkah

Ujian asid nukleik pada masa ini merupakan cara yang berkesan untuk menentukan sama ada virus itu membawa coronavirus baharu. Pada masa ini, orang ramai terutamanya menggunakan sapu hidung, sapu tekak dan serum antibodi lgm untuk rujukan. Tetapi mengikut keperluan kemasukan Singapura terkini, ujian asid nukleik PCR dilakukan, jadi apakah maksud ujian asid nukleik PCR?

Apakah maksud pengesanan asid nukleik PCR

PCR bermaksud tindak balas rantai polimerase, yang boleh digunakan untuk menguatkan DNA, untuk menguatkan sejumlah kecil DNA ke tahap yang boleh dikesan. Asid nukleik sesetengah virus ialah DNA, dan kaedah ini perlu digunakan untuk pengesanan. Oleh itu, PCR bukanlah pemeriksaan yang dilakukan, tetapi kaedah pengesanan DNA. Sebagai contoh, kuantifikasi DNA virus hepatitis B menggunakan kaedah ini. Tujuan pemeriksaan DNA adalah untuk mendiagnosis penyakit di satu pihak. Sekiranya DNA patogen dapat dikesan, ini bermakna patogen itu dijangkiti; sebaliknya, ia adalah untuk menilai berapa banyak virus telah mereplikasi, untuk menilai keterukan penyakit atau kesan rawatan.

Kaedah dan langkah pengesanan asid nukleik PCR

Ujian asid nukleik memerlukan lima langkah: pensampelan, pengekalan sampel, pengekalan, pengekstrakan asid nukleik dan ujian komputer.

Langkah pertama dalam pengesanan asid nukleik ialah mengumpul rembesan manusia, dan mengelap rongga hidung atau dinding belakang pharynx dan tonsil pharyngeal dua hala dengan ujian hidung atau ujian pharyngeal.

Dalam langkah kedua, kakitangan perubatan menyimpan sampel, merendam kepala kepingan ujian dalam larutan pemeliharaan sel, dan skru penutup tiub serta-merta selepas memecahkan ekor.

Di bahagian ketiga, masukkan sampel ke dalam beg kedap udara, simpan dan hantar untuk pemeriksaan tepat pada masanya.

Langkah keempat ialah menghantar sampel ke makmal untuk mengekstrak asid nukleik.

Dalam langkah kelima, ekstrak tertakluk kepada tindak balas penguatan PCR pendarfluor.

Apakah asid nukleik

Asid nukleik (asid nukleik) adalah sejenis makromolekul biologi yang terdiri daripada nukleotida (nukleotida), dibahagikan kepada asid ribonukleik (RNA) dan asid deoksiribonukleik (DNA), di mana RNA kebanyakannya struktur Rantaian tunggal, DNA kebanyakannya struktur berikat dua. Sebagai tambahan kepada prion, asid nukleik adalah makromolekul biologi yang diperlukan untuk kehidupan. Fungsi utamanya adalah untuk membentuk pembawa maklumat genetik kehidupan. Di samping itu, beberapa asid nukleik boleh digunakan sebagai dan mengambil bahagian dalam pembentukan enzim aktif secara biologi. Molekul atau mesin molekul lain.

Apakah ujian asid nukleik

Pengesanan asid nukleik, seperti namanya, adalah untuk mengesan asid nukleik.

Apakah kelebihan unik ujian asid nukleik? Mengapakah ia boleh digunakan sebagai quot"gold standard" untuk diagnosis coronavirus baru?

Malah, setiap kaedah pengesanan mempunyai senario aplikasinya sendiri. Mengambil pengesanan virus sebagai contoh, objek pengesanan kaedah pengesanan imunologi biasa (koloid emas, ELISA, chemiluminescence, dll.) ialah antigen atau antibodi virus, yang bersamaan dengan"lukisan sisi". Memandangkan terdapat tetingkap masa daripada jangkitan kepada kebolehkesanan, kaedah pengesanan imunologi umumnya tidak sesuai untuk diagnosis awal.

Apakah maksud pengesanan asid nukleik PCR, kaedah dan langkah

Positif palsu dan negatif palsu

1. Positif palsu

Biasanya terdapat lebih sedikit positif palsu. Secara amnya, pengendalian kakitangan makmal yang tidak betul boleh menyebabkan pencemaran silang antara sampel atau sisa pencemaran produk yang dikuatkan. Dalam kes ini, positif palsu mungkin disebabkan.

Walau bagaimanapun, positif palsu boleh dielakkan dengan berkesan dengan mengawal ketat proses pengesanan dan melaksanakan strategi mengambil bahagian secara rawak dalam pengesanan beberapa sampel negatif.

2. Negatif palsu

Apa yang perlu dijelaskan di sini ialah negatif palsu dalam pengesanan PCR dan negatif palsu klinikal sebenarnya bukan konsep yang sama.

Mengambil diagnosis koronavirus baharu, yang dibincangkan secara intensif di Internet, sebagai contoh, negatif palsu klinikal merujuk kepada kes di mana gejala klinikal dan kajian pengimejan sangat disyaki dijangkiti, tetapi ujian PCR berulang kali atau sentiasa negatif; dan ujian PCR negatif palsu merujuk kepada yang dikumpul Terdapat jumlah coronavirus baharu yang mencukupi dalam sampel tetapi ia tidak dikesan.

Untuk mengelakkan negatif palsu dalam ujian asid nukleik, keperluan utama yang perlu diselesaikan ialah: (1) terdapat virus yang mencukupi dalam sel orang yang dijangkiti, (2) sel yang mengandungi virus boleh dikumpulkan dalam sampel yang dikumpul, dan (3) ) virus dalam sampel dikesan Ketiga-tiga pautan ini.

Antaranya, parameter teknikal kit PCR terutamanya mempengaruhi pautan pengesanan ketiga.

Hanya untuk pautan ujian ketiga, jika bilangan virus dalam sampel berada di bawah tahap tertentu (di bawah had pengesanan minimum), kit PCR tidak akan dapat mengesannya. Dari perspektif ini, negatif palsu dalam pengesanan PCR tidak dapat dielakkan sepenuhnya. Inilah sebabnya mengapa perlu untuk menambah pembangunan ujian antibodi khusus virus.