Keperluan asas untuk pengumpulan spesimen
1. Spesimen kes dimasukkan ke hospital dikumpul oleh kakitangan perubatan hospital di mana ia berada, dan spesimen kontak rapat dikumpulkan oleh agensi kawalan penyakit dan institusi perubatan tempatan yang ditetapkan. Apabila mengumpul spesimen, kawasan persampelan yang berbeza harus ditetapkan mengikut objek pengumpulan yang berbeza. Pesakit demam pergi ke klinik demam untuk rawatan dan persampelan. Institusi yang tidak mempunyai klinik demam perlu menyediakan kawasan persampelan khas untuk pesakit demam, dan sampel pesakit demam dan kumpulan ujian lain untuk mengelakkan persimpangan. jangkitan. 2. Orang yang dijangkiti tanpa gejala, kakitangan kemasukan, dan kenalan rapat harus mengumpul swab nasofaring untuk ujian asid nukleik semasa pengasingan dan pemerhatian. Dua sampel swab nasofaring hendaklah dikumpul pada masa yang sama apabila pengasingan dilepaskan, dan reagen pengesanan asid nukleik yang berbeza harus digunakan untuk ujian masing-masing. Pada dasarnya, ujian sekunder dijalankan oleh institusi ujian yang berbeza. 3. Mengikut keperluan ujian klinikal dan makmal, berbilang sampel boleh diambil semasa kemasukan ke hospital dan pengasingan, dan berbilang sampel seperti saluran pernafasan, darah dan najis boleh dikumpul pada masa yang sama. Kakitangan pensampelan hendaklah mematuhi spesifikasi pensampelan dengan ketat untuk mengumpul spesimen bagi memastikan kualiti spesimen yang dikumpul memenuhi keperluan. Pada masa yang sama, mereka harus merekodkan maklumat pemeriksa secara terperinci, dan boleh menggunakan pengimbasan kod bar dan kaedah maklumat lain untuk mengumpul maklumat yang berkaitan. 4. Untuk saringan populasi, tiub pensampelan hendaklah ditentukan mengikut keperluan reagen yang digunakan untuk pengekstrakan dan pengesanan asid nukleik, dan tiub pensampelan yang mengandungi agen penyahaktif virus (garam guanidin atau surfaktan, dsb.) boleh dipilih. Spesimen yang digunakan untuk pengasingan virus hendaklah diletakkan dalam tiub pensampelan yang tidak mengandungi agen penyahaktifan virus. 5. Item dan pemantauan alam sekitar hendaklah berdasarkan tujuan pemantauan dan keperluan pencegahan dan kawalan untuk menentukan item persampelan, lokasi dan kuantiti, persampelan hendaklah mengikut spesifikasi persampelan dengan ketat.
(4) Jenis spesimen yang dikumpul. Setiap kes mesti mengumpul spesimen saluran pernafasan akut (termasuk spesimen saluran pernafasan atas atau spesimen saluran pernafasan bawah). Dalam kes yang teruk, spesimen saluran pernafasan bawah hendaklah dikumpul terlebih dahulu; spesimen najis, spesimen darah keseluruhan, spesimen serum, dan spesimen najis boleh dikumpul mengikut keperluan klinikal. Spesimen air kencing. Artikel dan spesimen alam sekitar dikumpul mengikut keperluan pemantauan.
Jenis spesimen: 1. Spesimen saluran pernafasan atas: termasuk swab nasofaring, sapuan tekak, dsb. 2. Spesimen saluran pernafasan bawah: kahak batuk dalam, cecair lavage alveolar, cecair lavage bronkial, aspirasi saluran pernafasan, dll. 3. Spesimen najis/dubur sapuan: kira-kira 10 gram (saiz kacang tanah) perlu dikumpulkan. Jika tidak mudah untuk menyimpan sampel najis, sapuan dubur boleh diambil. 4. Spesimen darah: darah antikoagulan, jumlah pengumpulan adalah 5ml, disyorkan untuk menggunakan saluran darah vakum yang mengandungi antikoagulan EDTA untuk mengumpul darah. 5. Spesimen serum: cuba kumpulkan sampel serum berganda semasa fasa akut dan pemulihan. Serum pertama perlu dikumpul secepat mungkin (sebaik-baiknya dalam tempoh 7 hari selepas permulaan penyakit), dan serum kedua perlu dikumpulkan dalam 3 hingga 4 minggu selepas permulaan penyakit. Isipadu pengumpulan adalah 5ml, dan disyorkan untuk menggunakan tiub pengumpulan darah vakum tanpa antikoagulan. Sampel serum digunakan terutamanya untuk penentuan antibodi, dan tiada pengesanan asid nukleik. 6. Spesimen air kencing: kumpulkan air kencing tengah pagi, jumlah pengumpulan ialah 2~3ml. 7. Spesimen permukaan: termasuk makanan rantaian sejuk yang diimport atau barang import pada permukaan pembungkusan dalam dan luar, serta alat pengangkutan dan penyimpanan dan bahagian lain yang mungkin tercemar oleh pengumpulan smear. 8. Sampel kumbahan: Menurut pengedaran sistem perparitan tapak pemprosesan dan rawatan barangan beku import berskala besar di pelabuhan laut, fokus pada pemilihan saluran kumbahan, pengumpulan rangkaian paip dalaman, hilir aliran kumbahan atau sambungan dengan rangkaian paip perbandaran, dsb. 2 hingga 3 mata Bit dijadikan sampel.
(4) Pengumpulan dan pemprosesan spesimen
1. Swab nasofaring: pensampel perlahan-lahan menyokong kepala orang yang akan diambil dengan sebelah tangan, dan memegang swab dengan tangan yang lain. Sapuan itu memasuki lubang hidung dan masuk ke dalam sepanjang bahagian bawah saluran hidung bawah perlahan-lahan. Kerana laluan hidung melengkung, ia tidak boleh diterima. Daya yang berlebihan untuk mengelakkan pendarahan traumatik. Apabila hujung sapuan mencapai dinding belakang rongga nasofaring, putar perlahan-lahan selama seminggu (sekiranya batuk refleks, tinggalkan seketika), kemudian perlahan-lahan keluarkan sapuan, dan rendamkan kepala sapuan dalam 2～3ml larutan pemeliharaan virus (juga boleh Gunakan larutan garam isotonik, cecair kultur tisu atau penimbal fosfat), buang ekor, dan skru penutup dengan ketat.
2. Swab pharyngeal: orang yang dikumpul hendaklah membilas mulut mereka dengan garam biasa, dan orang yang mengambil sampel hendaklah membasahkan swab dalam garam steril (dilarang meletakkan swab dalam larutan pengawet virus untuk mengelakkan antibiotik yang menyebabkan alahan), dan orang yang dikumpul Condongkan sedikit kepala, buka mulut, dan buat"ah" bunyi, mendedahkan tonsil pada kedua-dua belah pihak, meletakkan swab di seluruh pangkal lidah, lap tonsil pada kedua-dua belah orang dengan sedikit kekuatan sekurang-kurangnya 3 kali, dan kemudian lap ke atas dan ke bawah farinks posterior sekurang-kurangnya 3 kali. Seterusnya, rendam kepala swab dalam tiub yang mengandungi 2 hingga 3 ml larutan pengawet virus (larutan garam isotonik, cecair kultur tisu atau larutan penimbal fosfat juga boleh digunakan), buang ekor, dan skru penutup tiub dengan ketat. Sapuan tekak juga boleh diletakkan dalam tiub yang sama dengan sapuan nasofaring.
3. Ekstrak nasofaring atau ekstrak saluran pernafasan: Gunakan pengumpul yang disambungkan kepada pam tekanan negatif untuk mengeluarkan lendir daripada nasofaring atau mengekstrak rembesan pernafasan daripada trakea. Masukkan kepala pengumpul ke dalam rongga hidung atau trakea, hidupkan tekanan negatif, putar kepala pengumpul dan tarik perlahan-lahan, kumpulkan lendir yang diekstrak, dan bilas pengumpul sekali dengan cecair pensampelan 3ml (anda juga boleh menggunakan pediatrik kateter disambungkan kepada picagari 50ml Pengumpul alternatif).
4. Kahak batuk dalam: Selepas pesakit mengalami batuk dalam, kumpulkan kahak yang batuk ke dalam tiub pensampelan yang mengandungi 3ml cecair pensampelan. Jika kahak tidak terkumpul dalam cecair pensampelan, 2 hingga 3ml cecair pensampelan boleh ditambah sebelum ujian, atau jumlah jus pencernaan kahak yang sama boleh ditambah. Formula larutan penyimpanan jus pencernaan sputum ditunjukkan dalam Jadual 1.
Apabila menggunakan, cairkan larutan simpanan kepada 50ml dengan air ternyahion, campurkan dengan isipadu kahak yang sama, atau rujuk kepada arahan reagen untuk digunakan, atau gunakan isipadu kahak yang sama dengan penimbal fosfat yang mengandungi 1g/L proteinase K untuk menukar kahak itu.
5. Cecair lavage bronkial: masukkan kepala pengumpul dari lubang hidung atau soket trakea ke dalam trakea (kira-kira 30cm dalam), suntikan 5ml garam biasa, hidupkan tekanan negatif, putar kepala pengumpul dan perlahan-lahan menarik balik, kumpulkan lendir yang diekstrak , Dan siram pengumpul dengan larutan pensampelan sekali, atau anda boleh menggunakan kateter pediatrik yang disambungkan ke picagari 50ml untuk menggantikan koleksi.
6. Cecair lavage alveolar: Selepas anestesia tempatan, masukkan bronkoskop gentian optik melalui mulut atau hidung melalui farinks ke dalam bronkus lobus tengah kanan atau segmen lingual paru-paru kiri, dan ketuk bahagian atasnya ke dalam pembukaan cawangan bronkial, dan perlahan-lahan menambahnya melalui lubang biopsi trakea. Salin fisiologi bakteria, 30-50ml setiap kali, jumlah 100-250ml, tidak boleh melebihi 300ml.
7. Spesimen najis: Ambil 1ml larutan pemprosesan spesimen, ambil spesimen najis sebesar kacang soya dan masukkan ke dalam tiub, tiup perlahan-lahan dan sedut 3 hingga 5 kali, biarkan ia berdiri pada suhu bilik selama 10 minit, sentrifuge pada 8000 rpm selama 5 minit, dan serap supernatan. Pengesanan. Penyelesaian rawatan spesimen tahi boleh disediakan dengan sendirinya, dan formula ditunjukkan dalam Jadual 2.
Larutan HANK'S atau larutan garam isotonik lain, cecair kultur tisu atau larutan penimbal fosfat juga boleh digunakan untuk melarutkan sampel najis untuk menyediakan penggantungan najis. Jika pesakit mengalami gejala cirit-birit, ambil 3~5ml spesimen najis, pipet perlahan-lahan untuk dicampur, sentrifuge pada 8000rpm selama 5 minit, dan serap supernatan untuk digunakan.
8. Swab dubur: Gunakan swab kapas steril untuk memasukkannya ke dalam dubur 3～5sm perlahan-lahan, kemudian putar perlahan-lahan keluar, segera masukkan ke dalam tiub pensampelan penutup skru luar 15ml yang mengandungi larutan pengawet virus 3～5ml, buang ekornya, dan putarkannya. Ketatkan penutup tiub.
9. Spesimen darah: Adalah disyorkan untuk menggunakan tiub pengumpulan darah vakum yang mengandungi antikoagulan EDTA untuk mengumpul spesimen darah 5ml. Mengikut jenis reagen pengekstrakan asid nukleik yang dipilih, gunakan darah keseluruhan atau plasma untuk pengekstrakan asid nukleik. Untuk mengasingkan plasma, sentrifuge seluruh darah pada 1500-2000 rpm selama 10 minit, dan kumpulkan supernatan dalam tiub plastik atas skru steril.
10. Sampel serum: Kumpul 5ml sampel darah dengan tiub pengumpulan darah tekanan negatif vakum, biarkan pada suhu bilik selama 30 minit, sentrifuge pada 1500-2000rpm selama 10 minit, dan kumpulkan serum dalam tiub plastik atas skru steril.
11. Spesimen permukaan: Rujuk kepada kaedah yang disyorkan dalam"Spesifikasi Teknikal untuk Pemantauan Alam Sekitar Coronavirus Baharu dalam Pasaran Perdagangan Pertanian (Perdagangan Pasaran)" (WS/T776—2021). Selepas swab pensampelan diserap sepenuhnya dengan larutan pengawet virus, sapukan pada permukaan semula dan kemudian sapukan swab. Masukkan semula ke dalam tiub pensampelan dan rendam, keluarkan dan sapukan sampel semula, ulangi lebih daripada 3 kali. Persampelan teragih berbilang titik dilakukan pada objek dengan permukaan yang besar.
12. Spesimen kumbahan: Rujuk kepada kaedah yang disyorkan dalam"Spesifikasi Teknikal untuk Pemantauan Alam Sekitar Coronavirus Baharu dalam Pasaran Perdagangan Pertanian (Perdagangan Pasaran)" (WS/T776—2021). Apabila mengumpul sampel sapuan kumbahan, rendam swab dalam kumbahan terjerap dan keluarkan swab. Letakkan semula tiub pensampelan untuk direndam, keluarkan dan rendamkannya semula ke dalam kumbahan, ulangi lebih daripada 3 kali, dan jalankan pensampelan teragih berbilang titik untuk setiap lokasi pensampelan kumbahan. Apabila mengumpul sampel air kumbahan, gunakan botol plastik polietilena untuk mengumpul 1L～1.5L kumbahan. Untuk pengumpulan kumbahan yang lebih besar daripada 1.5L, anda boleh menggunakan baldi plastik polietilena atau peralatan pengayaan khas untuk sampel air di tapak. Sebelum mengumpul sampel air kumbahan, ia perlu dicampur dengan teliti dan kemudian diambil sampel; jika kumbahan sukar bercampur dengan baik dan berlaku stratifikasi, persampelan boleh dilakukan secara berlapis-lapis mengikut nisbah isipadu air setiap lapisan.
13. Bahan lain: kumpul mengikut keperluan dan spesifikasi reka bentuk.
(5) Pembungkusan spesimen
Selepas spesimen dikumpul, ia dimasukkan ke dalam kabinet keselamatan biologi makmal keselamatan biologi peringkat kedua.
1. Semua spesimen hendaklah diletakkan di dalam tiub pengumpulan sampel saiz yang sesuai dengan penutup skru dan gasket di dalamnya, yang tahan beku, dan diketatkan. Nombor sampel, jenis, nama dan tarikh pensampelan ditunjukkan pada bahagian luar bekas. 2. Masukkan spesimen bertutup ke dalam beg tertutup, setiap beg terhad kepada satu spesimen. Keperluan pembungkusan sampel mesti memenuhi piawaian"Peraturan Teknikal untuk Pengangkutan Selamat Barang Berbahaya melalui Udara". 3. Apabila pengangkutan spesimen luar terlibat, pembungkusan tiga lapisan hendaklah dijalankan mengikut jenis spesimen dan bahan berjangkit Kelas A atau Kelas B.
(6) Pemeliharaan spesimen
Spesimen yang digunakan untuk pengasingan virus dan pengesanan asid nukleik harus diuji secepat mungkin. Spesimen yang boleh diuji dalam masa 24 jam boleh disimpan pada suhu 4°C; spesimen yang tidak dapat dikesan dalam masa 24 jam hendaklah disimpan pada -70°C atau lebih rendah (jika tidak- Simpan pada suhu 70°C dalam peti sejuk pada -20°C). Sampel serum boleh disimpan pada suhu 4°C selama 3 hari, dan boleh disimpan lama di bawah -20°C. Perpustakaan khas atau kaunter khas hendaklah disediakan untuk menyimpan spesimen secara berasingan.
(7) Serahkan spesimen untuk pemeriksaan
Spesimen hendaklah dihantar ke makmal secepat mungkin selepas pengumpulan, dan spesimen tidak boleh diletakkan pada suhu bilik (25°C) selama lebih daripada 4 jam selepas pengumpulan. Jika pengangkutan jarak jauh diperlukan, adalah disyorkan untuk menggunakan ais kering dan kaedah penyejukan lain untuk penyimpanan. Elakkan pembekuan dan pencairan berulang semasa pengangkutan spesimen.
1. Hantar spesimen
Semua kes asal atau awal dalam wabak tempatan yang ditemui di pelbagai wilayah (wilayah autonomi dan majlis perbandaran), kes utama yang berkaitan dengan epidemiologi kes awal, kes tempatan dengan sumber jangkitan yang tidak diketahui, kes import dari luar negara, barangan import dan alam sekitar yang berkaitan spesimen positif, dsb. Sekurang-kurangnya 2 spesimen perlu dikumpulkan secara selari, satu dihantar ke setiap agensi kawalan penyakit wilayah untuk ujian, satu lagi dihantar ke Pusat Kawalan dan Pencegahan Penyakit China untuk ujian dan semakan, dan borang penyerahan sampel dilampirkan (lihat Lampiran 10-1). Strain wakil baharu yang diasingkan dari pelbagai wilayah harus dihantar segera ke Pusat Kawalan dan Pencegahan Penyakit China untuk semakan dan pemeliharaan.
2. Pengangkutan spesimen dan terikan
(1) Pengangkutan domestik strain coronavirus baru atau bahan biologi lain yang berpotensi berjangkit dikelaskan sebagai Kelas A, dan nombor PBB yang sepadan ialah UN2814. Pembungkusan mematuhi klasifikasi PI620 dokumen ICAO Doc9284"Arahan Teknikal untuk Pengangkutan Selamat Barang Berbahaya melalui Udara" Keperluan pembungkusan: Sampel alam sekitar tergolong dalam kategori B, dan nombor PBB yang sepadan ialah UN3373. Pembungkusan memenuhi keperluan pengelasan PI650 dokumen ICAO Doc9284"Peraturan Teknikal untuk Pengangkutan Selamat Barang Berbahaya melalui Udara"; pembungkusan standard di atas boleh dirujuk untuk pengangkutan dengan cara pengangkutan lain. Pengangkutan strain coronavirus baharu atau bahan lain yang berpotensi berjangkit harus dikendalikan mengikut"Peraturan Pentadbiran Mengenai Pengangkutan Spesies atau Sampel Mikroorganisma (Virus) Sangat Patogenik yang Boleh Menjangkiti Manusia" (dahulunya Perintah Kementerian Kesihatan No. 45) untuk"Sijil Permit Pengangkutan" .
(2) Pengangkutan antarabangsa Spesimen atau strain coronavirus baharu yang diangkut ke peringkat antarabangsa hendaklah dibungkus dengan cara yang standard, melalui prosedur yang berkaitan mengikut"Peraturan mengenai Pentadbiran Sanitari dan Kuarantin Kemasukan dan Keluar dari Artikel Khas", dan memenuhi keperluan kebangsaan dan antarabangsa yang berkaitan.
(3) Penerimaan dan pengurusan spesimen dan strain virus. Spesimen yang diangkut melalui udara tiba di lapangan terbang destinasi dan diangkut dengan kenderaan pengangkutan profesional ke unit penerima. Spesimen yang diangkut melalui darat diangkut dengan kenderaan profesional. Pengangkut dan penerima hendaklah berurusan dengan tanda Double spesimen untuk penerimaan. Spesimen dan strain coronavirus baharu harus diuruskan oleh orang yang berdedikasi, merekodkan dengan tepat sumber, jenis, kuantiti, dan pendaftaran nombor spesimen dan strain, mengambil langkah yang berkesan untuk memastikan keselamatan strain dan sampel, dan mencegah dengan ketat. penyalahgunaan, penggunaan berniat jahat, kecurian dan kecurian. Rompakan, kehilangan, kebocoran dan kejadian lain.
02
Ujian makmal coronavirus baru