Soalan Dan Jawapan Mengenai Pemilihan Bahan Habis PCR?

Bak kata pepatah, jika seorang pekerja ingin melakukan kerja yang baik, dia mesti mengasah peralatannya terlebih dahulu. Pemilihan bahan guna habis adalah sangat penting untuk mendapatkan keputusan eksperimen PCR yang memuaskan. Apabila menganalisis keputusan PCR, kami sering menumpukan pada analisis primer, kepekatan enzim, suhu dan masa, tetapi mengabaikan bahawa bahan guna PCR juga merupakan salah satu faktor yang mempengaruhi. Terdapat banyak jenis bahan habis pakai PCR, bagaimana untuk memilih bahan habis pakai PCR yang betul? Berikut ialah beberapa soalan untuk membantu anda mencari jawapan anda.

bahan habis pakai pcr

1. Mengapakah bahan habis pakai PCR umumnya diperbuat daripada PP?

Sama ada PCR biasa atau PCR kuantitatif pendarfluor masa nyata (qPCR), biasanya bahan habis gunanya akan berhubung terus dengan reagen atau sampel, jadi bahan berkualiti tinggi dan teknik pemprosesan yang baik diperlukan dalam proses pengeluaran dan penyediaan. Bahan habis guna am diperbuat daripada polipropilena (PP). Polipropilena (PP) adalah bahan lengai secara biologi, permukaannya tidak mudah melekat pada biomolekul, dan mempunyai rintangan kimia yang baik dan toleransi suhu.

2. Bagaimana untuk memilih tiub/plat PCR dengan isipadu yang berbeza?

Isipadu biasa untuk tiub/plat PCR:

• Tiub tunggal/{{0}}tiub/12-tiub: 0.5mL, 0.2mL, 0.1mL

• {{0}}plat perigi: 0.2mL, 0.1mL

• {{0}}plat perigi: 0.02mL

Spesifikasi untuk tiub/plat PCR:

Pilih produk yang sesuai mengikut keperluan eksperimen tertentu. Isipadu kebanyakan tiub PCR boleh memenuhi keperluan tindak balas PCR. Spesifikasi kapasiti tersedia dalam kapasiti standard dan kapasiti rendah. Secara amnya, adalah disyorkan untuk memilih tiub kapasiti rendah terlebih dahulu. Oleh kerana tiub/plat reaktor volum rendah mempunyai ruang kepala yang kurang, pemindahan haba dipertingkatkan dan penyejatan dikurangkan. Pada masa yang sama, adalah perlu untuk mengelak daripada menambah terlalu banyak atau terlalu sedikit sampel semasa menambah sampel. Terlalu banyak boleh menyebabkan penurunan kekonduksian terma, tumpahan dan pencemaran silang, manakala terlalu sedikit boleh menyebabkan kehilangan penyejatan sampel.

3. Apakah perbezaan antara penutup rata/tudung cembung bagi tiub tunggal atau 8-tiub baris?

Apabila volum sampel kecil, tiub tunggal atau {0}}tiub tiub diutamakan. Walau bagaimanapun, apabila keperluan isipadu tindak balas adalah besar, tiub tunggal diguna pakai, dan isipadu boleh mencapai 0.5 mL. Terdapat dua jenis tiub tunggal dan 8-tiub tiub dengan penutup rata dan penutup cembung, masing-masing mempunyai kelebihan tersendiri. Penutup rata menyediakan penghantaran isyarat pendarfluor yang tepat untuk qPCR; mudah untuk menulis pada penanda. Penutup cembung bersentuhan dengan penutup instrumen PCR untuk mengurangkan ubah bentuk tiub yang disebabkan oleh tekanan; walau bagaimanapun, ia akan menjejaskan penghantaran isyarat pendarfluor dan tidak boleh digunakan pada eksperimen qPCR.

4. Apakah perbezaan dalam senario penggunaan 96-plat perigi yang berbeza?

96-plat perigi secara amnya dibahagikan kepada plat tidak berskirt, plat separa berskirt dan plat berskirt penuh.

Plat tanpa skirt: Serasi dengan kebanyakan kitar haba atau mesin qPCR, tetapi tidak sesuai untuk aplikasi automatik. Kestabilan tidak tinggi semasa proses pipet, dan ia perlu digunakan dengan pemegang plat.

Plat separa skirt: Ia boleh disesuaikan untuk melabel atau menggunakan kod bar, dan aplikasi automatik, dan mempunyai kestabilan paip yang baik.

Plat skirt penuh: sangat sesuai untuk aplikasi makmal automatik, tetapi juga sesuai untuk aplikasi label dan kod bar. Kekuatan mekanikal yang baik, sesuai untuk mesin PCR dengan modul yang menonjol, dan kestabilan tinggi semasa pemipetan.

5. Adakah bahan plat/tiub PCR lebih tebal dan lebih stabil?

tidak. Bahan habis pakai PCR mesti mempunyai ketebalan dinding yang seragam untuk menyediakan pemindahan haba yang konsisten. Dinding tiub ultra-nipis adalah 50 peratus lebih nipis daripada versi standard, yang boleh mengurangkan lagi halangan haba, menghasilkan tindak balas yang lebih pantas dan lebih baik.

6. Untuk 96-plat perigi atau 384-telaga, mengapakah sudut potong dan label tidak sama?

Pemotongan penjuru: Pilihan kedudukan pemotongan penjuru plat PCR bergantung pada keperluan instrumen yang disesuaikan untuk kedudukan yang mudah.

Pengenalan: Penandaan abjad angka pada plat PCR membantu mengenal pasti telaga individu dan lokasi sampel. Secara amnya, ia ialah logo nombor berwarna terangkat atau logo terukir. Untuk beberapa eksperimen aplikasi automatik, plat tindak balas dengan tanda bercetak akan dimeterai dengan lebih baik.

7. Beberapa telaga plat PCR menonjol, manakala yang lain rata. Mana satu lebih baik?

Apa yang sesuai itu bagus. Plat PCR biasa mempunyai dua jenis: tepi telaga rata dan tepi telaga terangkat. Plat tindak balas dengan tepi telaga rata, sesuai untuk kebanyakan kitaran haba. Plat tindak balas di tepi lubang riser adalah mudah untuk pengedap, yang boleh mengurangkan risiko pencemaran silang antara sampel.

8. Bagaimana untuk memilih tiub/plat PCR yang berbeza warna?

Untuk tindak balas PCR biasa, tindak balas telus boleh digunakan. Dalam tindak balas PCR masa nyata, sensitiviti dan konsistensi tiub putih adalah lebih tinggi. Dinding tiub putih menghalang pendarfluor daripada melalui dinding tiub dan pembiasan, dengan itu menghalang pendarfluor daripada lulus ke modul pemanasan, diserap oleh modul, atau memantul secara tidak konsisten. Berbanding dengan tiub lutsinar, isyarat pendarfluor yang lebih kuat dan lebih fokus boleh dikumpulkan di bahagian atas tiub putih.