4 Sebab Tercemar Semasa Eksperimen PCR

Jan 26, 2022 Tinggalkan pesanan

Disebabkan oleh wabak koronavirus baharu, pembinaan makmal penguatan gen PCR di pelbagai tempat telah dipercepatkan secara beransur-ansur. Pengesanan asid nukleik virus adalah standard penting untuk diagnosis pneumonia koronari baru. Makmal PCR, juga dikenali sebagai makmal penguatan gen, menggunakan teknologi biologi molekul. Dengan menguatkan serpihan asid nukleik, ia juga boleh dianggap sebagai replikasi asid nukleik khas secara in vitro. Sistem pengesanan gen digunakan untuk memahami kandungan virus dalam tubuh manusia, dan ketepatan pengesanan boleh mencapai tahap nanometer. Pengesanan asid nukleik coronavirus baharu juga tergolong dalam kategori teknologi ini dan merupakan standard penting untuk diagnosis radang paru-paru koronari baharu.

Makmal penguatan gen PCR terutamanya menguatkan templat asid nukleik pengesanan. Dapat dilihat bahawa pencemaran silang berkemungkinan besar berlaku di makmal, mengakibatkan keputusan positif palsu dalam spesimen ujian. Oleh itu, makmal PCR mempunyai keperluan dan piawaian reka bentuk yang ketat.

Kini teknologi PCR telah digunakan secara meluas dalam bidang penyakit berjangkit, penyasaran tumor, genetik pembiakan, dan lain-lain. Walau bagaimanapun, disebabkan amplifikasi asid nukleik yang berbilang dan besar yang akan diuji oleh teknologi ini, walaupun jumlah pencemaran yang sangat kecil boleh mudah membawa kepada kedua, PCR Keperluan teknikal adalah agak tinggi, dan proses eksperimen adalah rumit. Jika terdapat peninggalan dalam pautan perantaraan, keputusan negatif palsu mungkin disebabkan.

1. Ia adalah pencemaran produk penguatan PCR. Ia juga merupakan punca pencemaran yang paling biasa. Selepas penguatan berulang produk PCR, jumlah replikasi jauh melebihi had pengesanan PCR, jadi walaupun jumlah pencemaran yang sangat kecil sudah cukup untuk menyebabkan positif palsu dalam keputusan eksperimen.

2. Pencemaran reagen. Semasa penyediaan reagen, sentuhan dengan bekas tercemar, pipet, hujung pipet, larutan, dsb., boleh menyebabkan pencemaran reagen.

3. Sampel yang akan diuji tercemar. Bekas di mana sampel diletakkan tercemar atau sampel tercemar disebabkan oleh pengedap bekas yang lemah; kedua, penggunaan pipet tercemar atau hujung pipet semasa proses pengekstrakan asid nukleik akan membawa kepada pencemaran sampel; di samping itu, beberapa sampel mengandungi virus, Jika meresap ke udara, pencemaran silang mungkin berlaku.

4. Pencemaran aerosol. Jika aerosol mengandungi virus dan bahan pencemar lain dan merebak ke udara, ia berkemungkinan besar menyebabkan pencemaran produk PCR. Aerosol dicipta oleh geseran antara udara dan permukaan cecair. Membuka penutup, menggoncang tiub tindak balas, dan menyedut pensampel pencemaran berulang kali boleh membentuk aerosol yang boleh membawa kepada pencemaran silang. Selepas pengiraan, satu zarah aerosol boleh mengandungi 48,000 bahagian, jadi perhatian khusus harus diberikan kepada pencemaran yang disebabkan oleh aerosol. Selagi makmal PCR tercemar, laporan keputusan sebelumnya adalah tidak sah dan operasi eksperimen lain tidak boleh dilakukan. Punca pencemaran mesti dikenal pasti dan dibuang secara menyeluruh untuk mendapatkan keputusan eksperimen yang tepat dan berkesan.